A. But et principes
But
A partir d'une souche appartenant au complexe
tuberculosis et préalablement isolée à partir d'un milieu solide ou
liquide, les coffrets ou trousses Bactec MGIT 960 permettent de tester
rapidement la sensibilité aux antituberculeux de première ligne. L'antibiogramme peut être effectué en
utilisant :
- la trousse Bactec MGIT 960 SIRE, pour tester la
Streptomycine (STR), l'Isoniazide (INH), la Rifampicine (RIF) et
l'Ethambutol (EMB).
- La trousse Bactec MGIT 960 PZA pour tester le
pyrazinamide.
- Pour tester des concentrations plus élevées
d'antibiotique, 3 trousses sont disponibles : Bactec MGIT 960 STR 4; Bactec MGIT 960 INH
0,4 et Bactec MGIT EMB 7,5.
Toutes ces trousses sont destinées au système Bactec MGIT 960.
Principes
Le tube BBL MGIT 7 mL avec indicateur de croissance
est un tube
contenant un bouillon Middlebrook 7H9 modifié qui permet la croissance et la
détection
des mycobactéries.
Le tube Bactec MGIT 960 PZA est un tube contenant un
bouillon modifié de Middlebrook 7H9 qui assure la croissance et la détection
des mycobactéries à un pH réduit de 5,9.
Les tubes MGIT contiennent un
composé fluorescent incorporé à la silicone présente au fond des tubes de 16 x
100 mm à
fond rond. Le composé fluorescent est sensible à la présence d'oxygène dissous
dans le
bouillon. La concentration d'oxygène dissous initiale éteint la fluorescence
du composé et
l'émission détectable est très faible. Par la suite, la croissance et la
respiration des
microorganismes consomment l'oxygène du milieu et permettent à la fluorescence
de
s'exprimer.
Ces tests sont basés sur une comparaison de la croissance d’un isolat
appartenant au
complexe M. tuberculosis
dans un tube contenant un antibiotique avec celle obtenue dans un tube sans
antibiotique (un témoin de croissance et un autre témoin de croissance à pH
5,9 pour l'interprétation du PZA). L’automate Bactec MGIT 960 contrôle en
permanence les tubes pour déceler toute augmentation de la fluorescence.
Il compare la fluorescence du tube contenant l’antibiotique à celle des
tubes témoins de croissance pour établir les résultats de l'antibiogramme.
Le Bactec MGIT 960 interprètera ces
lectures et donnera
un résultat de sensibilité ou de résistance.
- La trousse Bactec MGIT 960 SIRE : test qualitatif
qui fournira les résultats de l'antibiogramme en 4
à 13 jours.
- Pour le pyrazinamide, la trousse Bactec MGIT 960 PZA : test qualitatif qui fournira un résultat en 4 à 21 jours.