A. Principe

Etest est une technique quantitative de détermination de la sensibilité aux antibiotiques. Ce système comporte un gradient d'antibiotique prédéfini, utilisé pour déterminer la Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) en µg/ml des différents antibiotiques pour les mycobactéries testées sur un milieu gélosé.
Une valeur de CMI représente la concentration minimale inhibitrice d'un antibiotique qui dans des conditions expérimentales bien définies, inhibe la croissance d'un germe. La CMI est considérée comme le critère de référence pour définir la sensibilité d'un micro-organisme à un antibiotique.
Etest combine les concepts des tests de dilution et de diffusion. Comme les méthodes de CMI, il permet une quantification immédiate de la sensibilité.

Etest se compose d'une mince bandelette de plastique inerte et non poreuse de 5 mm de large et 60 mm de long. Un côté de ce support présente une échelle de lecture de CMI en µg/ml avec un code à deux lettres identifiant l'antibiotique. Un gradient exponentiel prédéfini d'antibiotique séché et stabilisé est immobilisé sur l'autre face du support, la concentration maximale se trouvant en "a" et le minimum en "b". Le gradient couvre une plage de concentrations continue de 0,002 à 32 µg/ml ou 0,016 à 256 µg/ml ou 0,064 à 1024 µg/ml selon les antibiotiques. Cette plage correspond à 15 dilutions doubles dans une détermination de CMI traditionnelle.

Lorsqu'une bandelette Etest est appliquée sur une boîte de gélose ensemencée, l'antibiotique est immédiatement libéré de la surface du support et se dépose sur la surface de la gélose. Un gradient continu et exponentiel de concentrations en antibiotique se crée juste en dessous du support. Après l'incubation, qui rend la croissance bactérienne visible, une ellipse d'inhibition symétrique, axée sur le support, se forme. Les bords de l'ellipse d'inhibition indique la valeur de CMI, exprimée en µg/ml.