Glossaire


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Culture des mycobactéries


En 1882 : Robert Koch obtient la première culture sur sérum de boeuf coagulé d'une mycobactérie appartenant au complexe tuberculosis.
En 1887 :  Nocard et Roux remarquent l'effet favorable de la glycérine. L'addition de 5 % de glycérine au bouillon ou à la gélose nutritive, permet d'obtenir une meilleure croissance des mycobactéries.

Grâce à la coloration de Ziehl-Neelsen, la présence de bacilles acido-alcoolo-résistants (BAAR) peut être diagnostiquée en quelques minutes. Cette technique qui est spécifique du genre mycobacterium, n'est malheureusement pas assez sensible. En effet, dans un produit biologique il faut au moins 104 bacilles/ml pour que l'examen direct soit positif.
Avec une division toutes les 20 heures pour M. tuberculosis et une division toutes les 20 minutes pour un germe banal, cette multiplication lente explique qu'il faudra attendre 3 à 4 semaines avant de voir apparaître des colonies visibles (au lieu de 12 à 24 heures pour d'autres bactéries). Par contre, la sensibilité de la culture est 2 à 3 fois supérieure à celui de l'examen microscopique.

En 1990, l'utilisation en routine du milieu liquide avec l'appareil Bactec® TB 460 (Becton Dickinson) permettra de diminuer sensiblement le temps de détection de M. tuberculosis.
En moyenne, le délai de détection sur un milieu de Löwenstein-Jensen est  de 28 jours, avec le milieu liquide il passe à 12 jours.

En pratique, il est recommandé d'associer 1 milieu liquide et au moins 2 milieux solides.

Milieux pour la culture des mycobactéries :

Pour la culture des mycobactéries de nombreux milieux existent.
Ils peuvent être divisés en 3 groupes :

  1. Milieux solides
  2. Milieux liquides
  3. Milieux mixtes (liquide/solide)

 

Préparation des milieux pour la culture des mycobactéries :

  • Milieux enrichis et milieux pour l'isolement de certaines mycobactéries
  • Traitement des prélèvements pour examen direct et culture :

  • Les différents prélèvements biologiques
  • Isolement d'une mycobactérie :

  • Repiquage d'une souche et identification biochimique